當(dāng)前位置:首頁(yè) > 實(shí)驗(yàn)服務(wù) > 分子檢測(cè)實(shí)驗(yàn) > 真核基因轉(zhuǎn)染
簡(jiǎn)要描述:通過(guò)非病毒方法將核酸引入真核細(xì)胞的過(guò)程定義為轉(zhuǎn)染。使用各種化學(xué),脂質(zhì)或物理方法,該基因轉(zhuǎn)移技術(shù)是在細(xì)胞背景下研究基因功能和蛋白質(zhì)表達(dá)的有力工具。將外源物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞的方法主要包括脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染),電轉(zhuǎn)或者病毒感染。病毒載體是進(jìn)行真核細(xì)胞基因工程、真核基因轉(zhuǎn)染的有力工具。
服務(wù)分類(lèi)
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常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類(lèi),一類(lèi)是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,一類(lèi)是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。
一、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
服務(wù)介紹:
通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將靶基因?qū)爰?xì)胞,一般在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)左右,靶基因即可在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?8小時(shí)后即可進(jìn)行靶基因表達(dá)的檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)。觀察目的基因及其表達(dá)蛋白在某種細(xì)胞中的功能(短時(shí)間即可進(jìn)行觀察,但效應(yīng)會(huì)很快丟失)。
客戶(hù)提供:
1、構(gòu)建好的外源基因載體,或由本公司進(jìn)行載體構(gòu)建(需提供目的基因名稱(chēng)、種屬、序列或Gene Accession Number)。
2、待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系(1×106個(gè)細(xì)胞,可傳代,倍增時(shí)間小于48小時(shí))以及細(xì)胞培養(yǎng)條件的說(shuō)明。
3、若需要檢測(cè)靶基因的表達(dá),需提供相應(yīng)抗體或由公司代購(gòu)。
交付內(nèi)容:
1、構(gòu)建好的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
2、實(shí)驗(yàn)報(bào)告:詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟及相關(guān)的外源基因表達(dá)分析。
二、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建
服務(wù)介紹:
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,就是轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上,使宿主細(xì)胞可長(zhǎng)期表達(dá)目的基因及蛋白。需要在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)上對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行篩選或者應(yīng)用高轉(zhuǎn)染效率的病毒,根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物進(jìn)行細(xì)胞傳代,從而得到可穩(wěn)定表達(dá)目的基因的細(xì)胞系。
客戶(hù)提供:
1、構(gòu)建好的外源基因載體,或選擇由公司構(gòu)建(價(jià)格參考載體構(gòu)建)。
2、待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系(1×106個(gè)細(xì)胞,可傳代,倍增時(shí)間小于48小時(shí))以及細(xì)胞培養(yǎng)條件的說(shuō)明。
3、提供相應(yīng)抗體
交付內(nèi)容:
1、構(gòu)建好的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系。
2、實(shí)驗(yàn)報(bào)告:詳細(xì)步驟、相關(guān)的外源基因表達(dá)分析等。
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